miércoles, 24 de junio de 2009

Practica N° 3 "Siembras con cajas de petri en forma de estria" 2Lm Roldán Gómez Jessica Elizabeth

Practica N° 3 “Siembras con cajas de petri en forma de estría”

*Índice
1.- Objetivo de la práctica
2.- Introducción
3.- Material
4.- Marco teórico
5.- Bitácora
6.- Conclusión

*Objetivo:
El objetivo de esta práctica se considero como el sembrado en los medios de cultivos de todos los desechos que fueron considerados para ello. Aquí cada uno de los estudiantes aprendió el sembrado y sus diferentes formas, así como sus propios nombres

*Introducción:
En esta práctica como ya lo mencionamos en el objetivo, se realizo el sembrado de los distintos desechos considerados, y para ello todos nosotros debemos tener habilidad, destreza e inteligencia para poder lograr con excelente finalidad esta práctica que forma parte de la gran secuencia de prácticas y a aprender nuevas cosas que nos ayudaran en las siguientes practicas.

*Material:
1.- Cajas de petri con medio de cultivo ya elaborado
2.- Muestras de desecho
3.- Asa bacteriológica
4.- Dos mecheros de Bunsen
5.- Vado de pp. 25 ml de agua destilada
6.- Papel para vestir mesa
7.- Papel secante
8.- Torundas de algodón
9.- Masking tape
10.- Jeringa 5ml
11.- Tubo con tapón rojo
12.- Centrifuga
13.- Tubo de ensaye vacío

*Marco teórico:
1.- Se prepara campo de esterilización y se esterilizan todos los materiales necesarios
2.- Ya esterilizados, se agregan 5ml de la muestra de orina al tubo vacío y se preparan para la extracción de sangre y se deja coagular.
3.- Se introduce a la centrifuga y se centrifugara a 1500 revoluciones por minuto, donde va a ver un proceso de separación por precipitación y ya centrifugado durante 5 min. Encontrándonos con separación de paquete sanguíneo y plasma.
4.- Ahora se obtienen las muestras interdentales e interdigitales, la interdental se obtendra con un isopo y se frotara por los dientes y la interdigital, con el portaobjetos, se realizara un raspado por la parte del pie y entre los dedos del paciente.
5.- Ya obtenidos todos los desechos cada alumno debera realizar un sembrado en diferentes medios de sembrado, debera etiquetarlo con los datos correspondientes.
6.- Cuando se etiquetan, se entregan al encargado de laboratorio, el cual, llevara los medios a proceso de incubación en la estufa.







*Bitacora
1.- Equipo de bioseguridad 5 min.
2.- Indicaciones 15 min,
3.- Esterilizacion de material 5 min
4.- Obtencion demuestra de sangre 3 min.
5.- Tiempo de cuagulacion 2 min.
6.- Tiempo en centrifuga 5 min.
7.- Obtencion de muestra interdental 2 min.
8.- Obtencion de muestra interdigital 5 min.
9.- Realizacion de sembrado de muestra 20 min.

*Conclusión:
Esta practica amplio su objetivo, ya que el alumno trabajo con los distintos tipos de siembra, y con las muestras, asi como la obtencion de ellas, y los distintos equipos como la centrifuga y materiales como los antes ya mencionados.

"Etapa Analitica" 2Lm Roldán Gómez Jessica Elizabeth

Etapa Analitica
* Este paso es clave en la planificacion estrategica porque nos va a permitir conocer cuales son los principales problemas con los que nos enfrentamos, y a partir de los cuales deberemos buscar las soluciones especificas.

Practica N° 1 y 2 " Medios de cultivo" y " Tecnica de esterilizacion" 2Lm Roldán Gómez Jessica ELizabeth

Practica N° 1 y 2 “Medios de cultivo y técnica de esterilización”

*Índice:
1.- Objetivo de la práctica
2.- Introducción
3.- Material
5.- Bitácora
6.- Conclusión

*Objetivo:
Esta práctica tiene como objetivo la preparación de medios de cultivo, como su nombre lo indica, aquí el alumno deberá poner en práctica su habilidad y destreza, asi como los conocimientos adquiridos anteriormente y dados por el profesor anteriormente, así como también aplicar la técnica de esterilización.

*Introducción:
En esta práctica que se va a realizar, se toma en cuenta las 3 etapas que se refieren a la preanalítica, analítica y postanalítica, las cuales se deben de compaginar con la práctica secuenciada donde el alumno de laboratorio de análisis clínicos, deben de estar puntuales con su equipo de bioseguridad en el laboratorio, para enseguida dar lugar a la realización de la práctica donde se pondrán en práctica los conocimientos anteriormente adquiridos en esta misma especialidad.

*Materiales:
1.- Matraz Erlenmeyer 250ml
2.- Vaso de pp. 250ml
3.- Vaso de pp. 50ml
4.- Varilla de cristal
5.- Vidrio de reloj
6.- Cajas petri 5-6
7.- embudo de cristal
8.- Espatula
9.- Balanza granataria
10.- Masking tape
11.- Torundas de algodón
12.- Papel secante
13.- Agar salmonella y shigella
14.- Dos mecheros de Bunsen
15.- Agua destilada

*Marco Teórico:
Una vez estando en el laboratorio, los alumnos, deberán habilitar el equipo de esterilización “Autoclave”, el cual se debe cargar con agua destilada.
Enseguida se debe vestir la mesa de laboratorio con papel blanco y pedir los materiales necesarios, y habilitar las líneas de gas LP.

1.- Para saber los gramos que se van a utilizar de agar se debe realizar una regla de tres con los datos que se indican en la etiqueta del agar salmonella shigella, pero para ello se deben saber los ml de agua que se van a utilizar y para saberlo, multiplicamos los 19 gr de cada caja petri, por el numero de cajas petri que se iban a utilizar, en este caso seis. Y como resultado dio 114ml y se realiza la siguiente regla de tres:
60gr--------->1000ml
Xgr---------->114ml

X= (60gr)(114ml)
1000ml

X= 6.84gr

2.- Se pesa el vidrio de reloj: 24.5 gr
3.- Y enseguida el vidrio de reloj con los 6.84gr de Agar, el cual pesó: 31.34gr
4.- Ya teniendo los 114ml de agua destilada y los 6.84 gr de agar se vacía el agar a través del embudo de cristal, que cabe hacer hincapié. Que todos los materiales utilizados deben de ser esterilizados por los dos mecheros de bunsen que forman un campo de esterilización.
5.- Ya vaciado se debe agitar con la varilla de cristal la mezcla para que no queden grumos y una ves agitado, debemos dejar reposar el tiempo que indica la etiqueta.
6.- Una vez reposado el producto se tienen ya listos los mecheros de bunsen y se realiza el proceso de ebullición al cual se le da un minuto, se realiza un pequeño giro en muñequeo por encima de la flama azul del mechero, con cuidado de que el producto no se derrame.
7.- Ya estando frío el medio de cultivo preparado, se taponea con algodón, sellado con masking tape café con los datos necesarios.
8.- Una vez ya listo se introducirá al autoclave y realizar el proceso de esterilización
9.- Una vez estando el medio de cultivo, se retira del autoclave y se deposita en medio de los mecheros de bunsen que forman el campo de esterilización.
10.- Con el vaso de pp. 50ml se realizara la actividad del vaciado pero antes se esterilizara la boquilla, una vez ya esterilizada, se vaciara la cantidad necesaria para el llenado de la caja, el cual debe ser cerca del campo de esterilización y cada caja deberá ser llanada por 19ml del medio de cultivo.
11.- Ya estando vaciado el medio de cultivo en la caja de petri esta se deja semi tapada, para que no exista vapor de agua hasta su solidificación.
12.- Al finalizar se estiva y se asegura con masking tape para etiquetar con los datos necesarios.


*Bitácora:
-Equipo de bioseguridad: 5min.
-Forrado de mesa: 2min
-Obtención de material: 2min
-Esterilización de materiales: 3min
- Peso de vidrio de reloj: 3min
- Regla de tres: 1min
-Vaciado de agua y agar al matraz: 2min
- Agitar el medio de cultivo: 3min.
- Hervir el medio de cultivo: 57seg.
- Esterilización en autoclave: 30min.
- Vaciado a cajas petri: 7min.
-Enfriamiento de medio de cultivo: 10min.



*Conclusión:
Esta práctica fue de gran importancia, ya que es el comienzo de toda una gama de prácticas a realizar y donde se aprendió como en todas las practicas ya realizadas algo nuevo, en este caso a preparar medios de cultivo.
Evidentemente es todo un proceso el que se lleva a cabo y se debe realizar con mucho cuidado. Si se tuvieron errores, pero se mejorar, y se desarrollara nuestra destreza y habilidad mental.
La práctica se realizo en 3 horas y debió de haber sido de dos, sin embargo el resultado para nosotros fue satisfactorio, siendo el principio de todas las practicas secuenciales.









ESTERILIZACION EN EL AUTOCLAVE
Una ves etiquetadas las cajas se entregan al encargado de la mesa para que introduzca los medios en la autoclave, pero es importante que se sepa muy bien sobre el uso del autoclave ya que su uso inadecuado puede ser peligroso ya que se manejen muy altas temperaturas. Los medios de cultivo duraron 20 min. en la autoclave para subir a 15 lbs. y 30 min. en la esterilización.






"Etapa Preanalitica" 2Lm Roldán Gómez Jessica Elizabeth

ETAPA PREANALÍTICA
*Asegura que se efectúe con calidad todo procedimiento anterior a la prueba tanto dentro como fuera del laboratorio

Carpeta de Practicas 3er Parcial "Laboratorio Clinico" 2Lm Roldán Gómez Jessi Elizabeth

Indice

*ETAPA PRE ANALÍTICA
1.-Práctica N°1 Medio de cultivo
2.-Práctica N°2 Técnica de esterilización

*ETAPA ANALÍTICA
3.- Práctica N°3 Siembras en forma de estrías en medios de cultivo
4.-Práctica N°4 Observación macroscópica
5.-Práctica N°5 “Frotis”
6.-Práctica N°6 Tinción Gram.
7.- Práctica N°7 Observación microscópica

*ETAPA POST ANALÍTICA
8.-Práctica N°8 Aglutinación en suero sanguíneo
9.- Práctica N°9 Aglutinación en sangre

sábado, 20 de junio de 2009

Borrador Practica N° 9 "Prueba de aglutinacion en sangre" 2Lm Roldán Gómez Jessica Elizabeth

Practica N° 9 “Prueba de aglutinación en sangre”
-Examen tipo sanguíneo
El alumno debe realizar la prueba de aglutinación en sangre fresca para poder llegar al análisis de tipos sanguíneos.

*Materiales
1.- Placa escavada de porcelana
2.- Palillos de madera
3.- Tubo de ensaye de tapón morado con anticoagulante
4.- Torniquete
5.- Jeringa hipodérmica desechable de 5ml
6.- Torundas de algodón alcoholizadas
7.- Torundas de algodón secas
8.- Papel para vestir mesa
9.- Gradilla
10.- Reactivos tipificadotes antiA, antiB y antiC

*Desarrollo
1.- Técnica de venopuncion
2.- Se atrae la sangre del pliegue del brazo en un volumen de 2.5 ml para trasvasarla al tubo con tapón morado que contiene anticoagulante.
3.- Una vez que se tiene la sangre fresca, se puntea en la placa escavada utilizando una pipeta Pasteur con bulbo.
4.- Ya estando la sangre en la placa escavada se le aplica una gota de reactivo tipificador A (color amarillo, color acul, color transparente), se toma pedacitos de madera, se mezclan cada uno y se espera a observar la reacción de aglutinación, la cual se presenta como si estuviera cortada la sangre en cualquiera de los 3 puntos.
5.- Ya observada la aglutinación, limpiamos equipo, entregamos para resguardarlo debidamente.
6.- Nota: Para poder entregar la evidencia de este trabajo se requiere tener los conceptos de la etapa preanalítica, postanalítica y postanalítica.
7.- Este trabajo de las 3 etapas debe ser secuenciado de la practica 1 a la 7, y teniendo como practica N° 10 la entrega de las 3 etapas de la prueba de aglutinación en plasma y practica N° 11 de la prueba de aglutinación en sangre. Este trabajo se debe de entregar ya elaborado con todos los graficos digitalizados con el pie de gráfico, asi mismo ser entregados el dia 10 de junio.

-Características de la entrega
1.- Este ultimo trabajo de las 11 practicas se debe de respaldar con los borradores en manuscrito y el trabajo que se debe presentar se debe de imprimir y debe llevar los señalamientos clasificados en forma de pestaña en cada una de las practicas en forma alusiva.
2.- El trabajo debe tener estructura de entrega que se dio al principio de semestre

Borrador Practica N° 8 "Prueba de aglutinacion en suero de sangre" 2Lm Roldán Gómez Jessica Elizabeth

Practica N° 8 “ Prueba de aglutinación en suero de sangre”
- Examen de laboratorio “ Reacciones febriles”
El alumno de laboratorio de análisis clínicos aprenderá a realizar una prueba de aglutinación en suero sanguíneo y sangre fresca, utilizando los instrumentos de laboratorio, equipo científico y reactivos para alcanzar su objetivo en la elaboración de un examen clínico denominado reacciones febriles; dando una oportunidad de poder investigar microorganismos bacteriológicos pertenecientes al grupo de las enterobacterias, donde encontraremos salmonella, brucilla y proteus.

*Materiales:
1.- Lamina de cristal para recciones febriles.
2.- Tubo de ensaye tapón rojo
3.- Palito de madera
4.- Torundas de algodón secas.
5.- Centrifuga
6.- Microscopio
7.- Reactivo febriclin
8.- Jeringa hipodérmica desechable
9.- Torniquete
10.- Torundas de algodón alcoholizadas
11.- Masking tape
12.- Pipeta Pasteur
13.- Bulbo

Nota: Utilizar técnica de venopuncion para la extracción de sangre fresca, donde se obtendrá por medio de centrifuga la separación de paquete sanguíneo y suero plasmático.
En esta prueba se debe de aplicar el tema de serológica, ya que ocuparemos los tíficos H y O, paratíficos AB, brucilla abourtus y proteus 0X19
Esta prueba es exclusivamente de aglutinación. Por lo que se debe de observar a tras luz en forma macroscópica y en el microscopio, en el objetivo 10x de forma microscópica.

*Desarrollo
1.- Se utiliza la técnica de venopuncion para la extracción de la sangre fresca de 2.5ml
2.- Unas ves obtenida la sangre se deposita en el tubo con tapón rojo, pero antes, en el inicio de la extracción y vaciamiento del tubo se toma el tiempo de coagulación, el cual es de 1-2 min. Hasta 5 min. Y en algunas ocasiones hasta de 8min.
3.- Ya coagulada la sangre se retira el tapón del tubo y se depositan todos los tubos en la centrifuga para centrifugar a 1500 revoluciones por minuto, esto nos dara como resultado separación de paquetes.
4.- Una vez que se tengan los paquetes de sangre y plasma se requiere un tubo de sangre vacío para trasvasar el plasma exclusivamente, con el que se va a trabajar el punteo en lamina de cristal utilizando la pipeta Pasteur para puntear.
5.- Ya obtenido el punteo del plasma en la lamina de cristal se le agrega una gota de reactivo febriclin tendiendo el cuidado necesario del orden de los cerotitos “O-H-A-B-BRUCELLA Y PROTEUS”
6.- Ya obtenido este proceso en orden de serotipos prensamos pequeños pedasos de palillos de madera y mezclamos de forma individual cada uno de ellos, no se debe utilizar el mismo palillo antes utilizado.
7.- Ya estando mezclada la solución plasmática y reactivo de febriclin realizamos pequeños movimientos de rotación y traslación.
8.- Ya terminada esa mezcla observamos de forma macroscópica a tras luz, y si observamos la imagen punteada quiere decir que es una prueba positiva, si no es asi, de le da el termino de homogéneo y será negativo.
9.- En la prueba que observamos el punteo, tanto macroscópicamente como microscópicamente, nos indica que tenemos una prueba de aglutinación en plasma y que debemos reportar de la siguiente manera.
O……negativo/positivo
H……negativo/positivo
A……negativo positivo
B……negativo/positivo
Brucella….negativo/positivo
Proteus…...negativo/positivo

Positivo para todas aquellas que se observe aglutinación y negativo para aquellas en las que no existe aglutinación

10.- En este examen de laboratorio, se lleva a cabo las 3 etapas: preanalitíca, analítica y post analítica